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全自动生化性能与应用

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全自动 生化 性能 应用
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第十九章 临床自动生化分 析仪的性能与应用 李兴武 附院检验科 1第十九章 生化分析仪 第一节 临床生化自动分析仪的类型 一、概述 ¨仪器的发展史、第一台1957年由美 国Technicon公司生产(Auto Analyzer),单通道连续流动式,只 是模仿手工。60年代后随电子计算 机技术迅速发展。从设计构造及速 度、功能方面有很大的发展。 2第十九章 生化分析仪 ①试剂自动检测:借助条码技术识别种 类及效期等。 ②样本自动识别:量多少,有无溶血、 脂血、黄疸、血球、凝块等。 ③自动加样:试剂、样本、稀释液等。 ④自动检测:样本杯、试剂架、反应杯 。 ⑤数据处理: ⑥打印报告: ⑦自动报警: 3第十九章 生化分析仪 •分类 按反应装置结构:连续流动式 、分立式和离心式。 按同时检测项目与否:单通道 、多通道。 按仪器的自动化程度:全自动 、半自动。 按仪器复杂程度:小型、中型 和大型。 4第十九章 生化分析仪 (一)管道式分析仪(P442) ①原理:吸样+吸试剂→混匀+( 第二试剂)→混匀→孵育→比色→ 计算→打印结果。 ②特点:所有反应在同一管道中 进行,一个接一个进行,可通过 透析器将干扰物除去、速度慢; 也有将多个通道并列起来。 5第十九章 生化分析仪 (二)、分立式分析仪 (P443) (1)原理:同一时期的测定在不同反 应杯中进行,试剂及样本由不同的 加样器自动加样,在一定温度下反 应一定时间后反应液依次自动吸入 比色杯比色或反应杯依次通过光路 进行检测;可有多个加样臂,所以 其体积大且速度快。 6第十九章 生化分析仪 (2) 仪器各部分简介: ① 标本架: 条形:适合于现在自动加样 圆形:有整圆形,节段组成的 7第十九章 生化分析仪 水及热空气等 废水等 样品盘 试剂盘 试剂针 样品针 清洗针 反应池 反应杯 分离式全自动生化分析仪府视图 试剂盘 8第十九章 生化分析仪 9第十九章 生化分析仪 ②比色杯 ¨质地:玻璃、塑料或石英; ¨人工更换:一次性反应比色杯 ¨仪器自动更换:一次性反应 比色杯 ¨自动清洗:反应杯可反复使用 10第十九章 生化分析仪 ③加样与采样器:一般采用机械 传动带动注射器活塞,阀门有电 磁控阀门,玻璃活塞等。 ④控温装置:一般温度有25℃、 30℃、37℃,也有连续式温度如 20℃~50℃等可任选; 11第十九章 生化分析仪 ¨恒温水(油)浴箱:温度比较稳 定,但水需要经常更换和处理, 以防影响比色杯表面光度; ¨电热恒温器:采用空气恒温时送 热风,温度波动较大,受外界影 响大; ¨半导体恒温:硅半导体介导恒温 ,介于两者之间。 ⑤反应时间控制: 随意设定 12第十九章 生化分析仪 ⑥检测器:试剂 样品及杯子 吸光度 等 ⑦清洗系统: ⑧干燥系统:与清洗系统共用 ⑨分析系统:结果、原始数据、是否 超出反应线性、酶反应时线性是否 合理等 ⑩打印机: 13第十九章 生化分析仪 (三)离心式生化分析仪 (P444) ①原理:圆盘内的样品和试剂 受到离心力的作用而相互混 合发生反应,在高速旋转过 程中进行比色测定。 14第十九章 生化分析仪 ②特点: ¨又称为成批测定或同步测定,即 分析过程中,样品与试剂的混合 、反应和检测等每一步几乎同时 完成。 ¨试剂和样本量:(样品1~50ul,试 剂50~350ul),视离心杯的底部 面积大小;速度一般,现很少生 产此类产品; 15第十九章 生化分析仪 ¨反应转盘:可用手工换,也可通 过自动换盘。无法自动清洗。 ¨转速一般在500~1000r/min; ¨仪器:美国Baker公司的Encore Ⅰ、Ⅱ型、IL的Monarch系列、 Roche公司的Cobas Fara-Ⅱ型等 16第十九章 生化分析仪 (四)干片式分析仪 (P444 ) ①原理:在干化学纸片上加上血清后 ,背面产生颜色,用反射光度计检 测即可定量; ②特点:是80年代问世的产品,是将 含底物的试剂浸入纸片后,经干燥 制得,干片由试剂和电极构成,一 次使用,成本高。但方便快捷。 ③缺点:结果波动性大。 17第十九章 生化分析仪 二、半自动生化分析仪 (1) 操作分两部分: ①手工部分:加样、保温、吸 入样本 ②仪器部分:比色、读数、计 算、打印结果。 18第十九章 生化分析仪 (2)特点: ¨体积小,结构简单,灵活, 价廉,适合标本量不大的小 型医院。 ¨比色快,速率法慢,不受试 剂、方法的限制,常规、急 诊使用方便。 19第十九章 生化分析仪 (3) 注意事项: ①使用同一比色池,重复性好 ,但结果受加样和取样的影 响。 ②作酶动学时,应注意计时准 确性,还应注意温度的波动 。 20第十九章 生化分析仪 ¨三、全自动生化分析仪 ¨概念:从加样本至出结果的全过程 由仪器来完成,受主观因素影响少 。 ¨功能全,灵活性大,易于操作,有 吸光度法、荧光法、光散射法、浊 度法、ISE法等。 21第十九章 生化分析仪 ¨常规生化、特殊蛋白、药物监测 等。 ¨随机安排程序,呆单项测定,也 可成批测定,可对数据进行统计 处理。 ¨模块式生化分析仪:采用多个相 同的或不同的生化分析仪通过传 送带等形式相互连接起来。 22第十九章 生化分析仪 第二节 临床生化自动分析仪的 性能评价及与合理选用(P446) ¨正确评价十分重要 一、自动化程度 ¨仪器自动化程度越高,功能越强 大,适合样本多、人员少、大型 医院;样本少的、检验数量少的 小医院等选用半自动或小型全自 动生化分析仪。 23第十九章 生化分析仪 二、分析效率 ¨指分析的速度,根据仪器每小时 测定样本数量及每个样本可测项 目的多少;离心式应进行成批测 定,如一个一个测定,则其效率 较低;但同时应考虑仪器的使用 效率,一个大型生化分析仪如样 本较少,则仪器的使用效率不高 。 24第十九章 生化分析仪 三、应用范围: ①项目:可测生化项目、还有药物监 测、各种特殊蛋白、微量元素等。 ②方法:分光光度法、浊度比色法、 离子选择性电极法、荧光法等。 ③波长:双波长法(三波长法),消除 背景噪音,排除溶血、脂血、胆红 素等干扰。 ④试剂:单试剂、双试剂、三试剂等 排除试剂或样本空白等。 25第十九章 生化分析仪 四、分析准确度 ¨准确度愈高愈好,取决于加 液、温控、波长、记时等的 加工精确度及状态,加样量 准确性、微量、系统稳定性 、机械结构精密度、加样中 针的携带污染等。 26第十九章 生化分析仪 五、试剂使用灵活性 ¨通常仪器所用试剂的范围也 是相当重要,试剂的开放程 度越高,使用的灵活性就大 ,有些仪器与试剂采用捆绑 方式,成本高,不利于开展 新工作。 27第十九章 生化分析仪 第三节 临床生化自动分析仪的方法 ¨要合理使用仪器,就必须首先了解仪器 的各项功能 一、分析方法: 28第十九章 生化分析仪 (一)平衡法(终点法 ) (1)一步法:试剂酶的底物(S )就是所测的物质(P448) (2)酶偶联反应;S1+S2 Ea→P1 +P2 Ei→P3+P4 Ea为辅酶 ,Ei为指示酶 29第十九章 生化分析仪 (二)动态法分为可变信号与固 定信号 30第十九章 生化分析仪 ¨一点与二点不需特殊的仪器;但 结果准确性差及可靠性差 ¨多点法、回归法及积分法为使用 生化分析仪的首选仪器。 (三) 固定时间法(二点法) ¨不需对反应过程进行观察,或只 需观察前后两点即可。 31第十九章 生化分析仪 (四) 空白对照方法 ¨样本+空白试剂; ¨试剂; ¨样本+完全试剂(终止反应后) 32第十九章 生化分析仪 二、主要实验参数的选择(设置 ) (一)波长:吸收曲线的低谷为 空白波长,吸光度大而平的波长 为分析波长;采用光栅或单色光 滤光器,光路采用后分光技术, 波长更准确。 (二)温度:现一般采用37℃。 33第十九章 生化分析仪 (三)、样品量及试剂量:一 般按手工法按比例缩减;但 可以根据不同仪器的情况自 行设计,但同时改变线性及 灵敏度。 试剂样本用量的多少是衡量 生化分析仪品质的一个重要指标。 34第十九章 生化分析仪 (四)分析时间确定 : (1)、终点法:一般选开始时间 (即试剂与样本混匀舜间,这样 反应还未开始但又能去除试剂与 样本的空白),结束时间一般以 反应达终点时的时间,计算 ⊿A=A末-A始 35第十九章 生化分析仪 (2) 动态法时间:选定读数 的起始点,即迟滞期后开始 ,结束时间一定要在线性反 应期内,计算按:⊿A/min= (A末-A始)/(TA末-TA始)。 36第十九章 生化分析仪 (五)线性判断标准(线性限度L) : ¨作为反应达终点时吸光度反应的 界限,这只是对于终点法实验来 说,若为酶促反应的话,很难观 察到终点的时间. ¨空白试剂吸光度:配好试剂是否 已变质。 ¨空白反应吸光度:看试剂在反应 温度下的稳定性。 37第十九章 生化分析仪 (六)异常吸收率限度:见下面的示意图 。 38第十九章 生化分析仪 三、仪器室条件及仪器操作 (一)、仪器室条件 (1)、电源、电压、UPS、温 度(15-30℃)、湿度、防 尘等。 (2)、操作常规:操作规程及 维修保养、专人保管使用等 39第十九章 生化分析仪 1、方法学:单试剂、双试剂、 与试剂盒。 2、加样系统:加样的准确性、 微量、系统稳定性、机械结 构精密、加样中的携带污染 。 40第十九章 生化分析仪 3、检测系统: ¨光源灯(卤素灯、钨丝灯、石英灯 、氙闪光灯) ¨单色光器(干涉滤片、光栅单色镜) ¨比色杯 ¨光电转换元件(硒光电池、光电 管、光电倍增管) ¨其他电器。 41第十九章 生化分析仪 4、控制系统:温度、校正系统 ; 5、仪器处理标本能力和适用范 围:每小时处理数量 6、实用性:与经济条件、技术 条件、操作、维修、性能、 价格。 42第十九章 生化分析仪 谢 谢! 再 见 43第十九章 生化分析仪
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