• / 28
  • 下载费用:25 金币  

金黄色葡萄球菌

关 键 词:
金黄色葡萄球菌
资源描述:
金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 一、生物学特性——菌体形态及培养特征 革兰氏阳性球菌,直径为0.5-1.0微米,镜检时呈单个、成 对、四联或不规则的簇群,如葡萄状,故称为葡萄球菌。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 大多数菌株产生类胡罗卜素,使细胞团呈现出深橙色 到浅黄色,色素的产生取决于生长的条件,故称金黄 色葡萄球菌。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 大多数菌株最适生长温度30-37℃,最适pH为7.0-7.5; 兼性厌氧菌,在好氧条件下生长最好; 可在15%氯化钠和40%胆汁中生长。 一般用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌或7.5% 氯化钠肉汤增菌。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 所有的毒株产生血浆凝固酶,人和动物来源的菌 株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。 金黄色葡萄球菌产生磷脂酶、蛋白酶、脂肪酶和 溶菌酶等,大多数菌株可水解天然的动物蛋白并释放 脂肪酸。在BP平板产生磷脂环。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 生物学特性 ——致 病 性 金黄色葡萄球菌为条件致病菌,菌株致病力的强弱主 要取决于其产生的毒素和侵袭性酶: a.溶血素:外毒素,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌 体局部缺血和坏死;在血平板培养出现溶血环。 b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞; c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血 液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬 细胞的吞噬作用。 d.脱氧核糖核酸酶(DNA酶) e.肠毒素:引起急性胃肠炎。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌 ,临床表现多种多样,可引起局部化脓感染,也可引起 肺炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 葡萄球菌皮肤感染 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾 病,可引发不同程度的急性胃肠炎症状,恶心、呕吐最 为突出而且普遍,腹痛、腹泻次之。 当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品 ,如牛奶和奶制品、肉、蛋等,在温度条件适宜时,经8 -10小时即可相当数量的肠毒素。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 二、检验程序与操作方法 根据中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准: 《食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验》 GB 4789.10-94 金 黄 色 葡 萄 球 菌 检 验 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 检样 25g(ml)+225ml灭菌生理盐水 国标:金黄色葡 萄球菌检验程序 直接计数方法增菌培养方法 Baird-parker(贝尔德- 帕克) 0.3ml、0.3ml、0.4ml 7.5%氯化钠肉汤或 胰酪胨大豆肉汤 血平板 血平板 ,Baird-parker 涂片染色 观察溶血 血浆凝固酶试验 报 告 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 检验程序 ——增菌培养 利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性(可耐受15%的 氯化钠),用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤或7.5% 氯化钠肉汤增菌。 置37摄氏度培养箱培养24小时。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 检验程序 ——分离培养 血平板:金黄色葡萄球菌可以产生溶血素,因此在血 平板上产生明显的溶血环。 典型菌落:呈金黄色,有时也为白色,大而突起,圆 形,不透明,表面光滑,有溶血环。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 大而突起,圆形,不透明, 表面光滑,有溶血环 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 血平板制作 成分:豆粉琼脂(或营养琼脂)100mL,脱纤维 羊血(或兔血)5-10mL。 制法:加热融化琼脂,冷至50℃,以无菌操作加 入脱纤维羊血或兔血,摇匀,倾注平板。或分装 灭菌试管,摆成斜面。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school BP(贝尔德- 帕克)平板: ü胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素 和矿物元素 ü丙酮酸钠是一种生长促进剂 ü亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有 毒性,并使菌落产生黑色 ü卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环 ü甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制 作用。 检验程序——分离培养 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 在BP平板上典型菌落为:灰色到黑玉色,圆形,光 滑突起,湿润,直径2-3mm,边缘常为淡色(米黄色或 灰色),周围为一混浊带,在其外缘常有一透明圈。用 接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感。 长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落,其黑 色常较典型菌落淡些,且外观可能粗燥,质地较干燥。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school B-P平板 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 革兰氏阳性,球形,组成葡萄状 检验程序 ——鉴定之革兰氏染色镜检 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 检验程序 ——鉴定之凝固酶试验 金黄色葡萄球菌可以产生血浆凝固酶,因此对其鉴别 的主要试验是测定其凝固酶。 方法一:试管法 吸取1:4新鲜兔血浆0.5mL,放入小试管中,再加入培 养24h的金黄色葡萄球肉浸液肉汤培养物0.5mL,振荡摇 匀,放36±1℃恒温箱或水浴内,每半小时观察一次,观察 6h,如呈现凝固,即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块者, 被认为阳性结果。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 试管法 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 阳性反应 阴性反应 不凝固 少量、 零散凝 固 明显的块 状凝固 巨大块 凝固 完全凝固, 倒置不流动 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 有凝块 血浆 均匀混浊 生理盐水 方法二:玻片法 在一张洁净玻片中央加1滴生理盐水,用接种环取 待检培养物与其混合(设阳性和阴性对照)制成菌悬液 ,若经10~20s内无自凝现象发生,则加入人或兔新鲜血 浆1环(不用稀释),与菌悬液混合,观察结果 。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 兔血浆制备 成分:柠檬酸钠0.106 mol/L (31.3g Na3C6H5O7·2H2O溶于1L蒸馏水中) 制法:一份加兔血9份混合后离心2000rpm, 10min吸取上清液即为兔血浆。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 葡萄糖肉浸液肉汤的制备 成分:绞碎牛肉500g,氯化钠5g,蛋白胨10g,磷酸氢二 钾2g,葡萄糖10g,蒸馏水1000mL,pH7.4~7.6。 制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g,与蒸馏水混合后 放冰箱24h,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣 完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水 补足原量。加入蛋白胨、葡萄糖,氯化钠和磷酸盐,溶解 后校正pH,煮沸并过滤、分装,121℃30min高压灭菌。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 25g样品+ 225ml 生理盐水 5mL样品匀液(1:10)+ 50mL胰酪胨大豆肉汤 血平板 36± 1℃ 24hr 镜 检 与 肉浸液肉汤培养 血浆凝固酶 试验 报告结果 定性定性 检测检测 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 6hr BP平板 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 25g样品+ 225ml 生理盐水 选三个连续梯度,每个梯度分别取1mL接种之至表面 干燥的BP平板(如0.4mL,0.3mL,0.3mL) 平板计数(分别记录每种 类型的菌落数) 36± 1℃ 48hr 血平板、镜 检与 肉浸液肉汤培养 血浆凝固酶试验 报告结果 金葡菌数 /g(mL) 定量定量 检测检测 (平板法)(平板法) 每种类型选取一个菌落 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 6hr 适用于检测金黄色葡萄球菌 数不小于10/g(mL)的食品 计算办法:(三个平板中疑 似金黄色葡萄球菌黑色菌落 数相加)×血浆凝固酶阳性 数÷5 ×稀释倍数 梯度稀释 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 第一天 器材准备、样品处理、增菌培养和BP平板分离接种 上午:准备的器材第一天下午 规格名称数量1、样品处理:鱼干、 腊肉 2、增菌培养 3、BP平板制备及分 离接种 4、采集兔血的准备: 抗凝剂制备、灭过菌 的容器和玻璃珠 250ml三角瓶 1个 10×100mm试管 6支 1ml移液管2支 10ml移液管2支 直径为90mm平皿8套 250ml量筒1支 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金色葡萄球菌检验食品安全检验技术(微生物部分) Whats the matter Mikecan you play the guitarwhat time do you go to school 第二天 接种选择性平板进行分离培养和玻片法血浆凝固酶试验 1、血平板制备及兔血浆制备 2、接种选择性平板 取增菌液1环,划线接种于血平板或B-P平板。 3、培养 放于36±1℃培养24h。 4、玻片法血浆凝固酶试验 第三天 观察分离结果、镜检和葡萄糖肉浸液肉汤制备及接种 第四天 血浆凝固酶试验(试管法)、实验报告 闽北职业技术学院食品与生物工程系
展开阅读全文
  麦档网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
0条评论

还可以输入200字符

暂无评论,赶快抢占沙发吧。

关于本文
本文标题:金黄色葡萄球菌
链接地址:https://www.maidoc.com/p-15678650.html

当前资源信息

范文库

编号: 20181001055519053675

类型: 共享资源

格式: PPT

大小: 659.50KB

上传时间: 2019-11-07

关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

[email protected] 2018-2020 maidoc.com版权所有  文库上传用户QQ群:3303921 

麦档网为“文档C2C模式”,即用户上传的文档所得金币直接给(下载)用户,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的金币归上传人(含作者)所有。
备案号:蜀ICP备17040478号-3  
川公网安备:51019002001290号 

本站提供办公文档学习资料考试资料文档下载


收起
展开