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乙肝免疫学检测课件

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and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝免疫学检测检测 疾控中心检验科 2010年12月20日 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies HBV基本特征 乙肝表抗及乙肝五项检测  开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察 表格 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies HBV基本特征 一、形态结构 在HBV感染者的血液中可见3种不同形态与大 小的HBV颗粒。 1.小球形颗粒,由空心病毒包膜组成,成份是 HBsAg,不含病毒核酸,无感染性。 2.管形颗粒,由小球形颗粒连接而成。小球形颗 粒和管形颗粒的产生是由于病毒颗粒包膜产量 过剩。具有与HBsAg相同的抗原性。 3.Dane颗粒,为完整的具有感染性的病毒颗粒 ,由包膜和核衣壳组成,HBsAg镶嵌在包膜脂 质双分子层中。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies HBV基本特征 二、基因组 HBV的基因组是已知DNA病毒中最小的,仅含 3200bp,组成独特的带有部分单链区的双链 DNA环状模式,长链为负链,短链为正链。 三、复制 HBV的感染周期大致可分为4个阶段: 1.感染性病毒感染肝细胞,将核衣壳释放进入细 胞质。 2.病毒DNA基因组进入细胞核,并转变成共价闭 合DNA,作为转录模板合成mRNA和前基因组 RNA,mRNA出细胞核,被翻译成病毒蛋白。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies HBV基本特征 3.前基因组RNA与2种基因产物相互作用,形成 未成熟的含RNA的核衣壳,在衣壳内,以前基 因组RNA为模板由P蛋白逆转录成全长的HBV DNA负链。 4.病毒以新合成的负链DNA为模板,自DR(核 苷酸同向重复序列,在正负链的5,端)区开 始复制互补的正链DNA,两者结合成双链不完 全环状DNA包装于衣壳中,以有包膜的病毒颗 粒出胞,没有核衣壳的表面蛋白的芽生形成小 球形颗粒和管形颗粒。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies HBV基本特征 四、敏感动物与细胞 1.敏感动物:HBV感染宿主具有明显的种属特异 性,人HBV的易感宿主只局限于人及黑猩猩、 恒河猴等高级灵长类动物。 2.敏感细胞:人原代肝细胞和肝癌细胞以及HBV 转染的细胞系。 五、理化性及抵抗力 病毒在30-32℃可存活至少6个月,在-20℃可 存活15年。病毒浓度较高时,60℃加热10h, 或98℃加热1min,以及乙醚或PH2.4处理6h均 不能有效灭活乙肝病毒。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 一、传染源 1.HBV携带者 2.乙型肝炎患者的血液、唾液、精液和阴道分 泌物等 二、传播途径 1.血液和血制品传播 2.性传播 3.母婴传播 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 一、标本采集 1.遵循无菌和安全采集的原则采集标本。 2.样本保存:如果在5d 内进行测定,应于24h内 分离血清或者血浆,将其存放在2-8℃;如果需 要5d后才能进行测定,必须将分离的血清或者 血 浆冻存。 二、测定方法 1.酶法 (ELISA):主要用于初检和复检。 2.试纸法(胶体金试纸条):主要用于初筛。 3.乳胶板块法:用于乙肝两对半的快速检测。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 以全血标本检测HBsAg为例(杭州艾康) and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 以血浆/血清标本检测乙肝五项为例(乳胶板 块法)(杭州艾康) and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 三、临床意义 1.HBsAg阴性,表示无HBV感染。 2. HBsAg阳性,表示有HBV感染,包括携带者和 乙肝患者。 3.乙肝五项检测的临床意义 血清学标志物 解释 血液传染性 HBsAg 抗-HBs 抗-HBc HBeAg 抗-HBe + - - + - 潜伏期或者急性乙肝早期 高 + - + + - 急性或慢性感染,抗HBVIgM 鉴别(“大三阳”) 高 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 血清学标志物 解释 血液传染性 HBsAg 抗-HBs 抗-HBc HBeAg 抗-HBe + - + - + 乙肝后期或者慢性携带者 低 (“小三阳”) - + + - + 痊愈或者恢复期, 无 有免疫力 - + + - - 痊愈,有免疫力 无 过去感染,但无法检出抗 - - + - - HBs; “低水平慢性感染” 未知 疫苗接种或者 - + - - - 很早以前曾感染过 无 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 四、个人防护 1.实验时必须穿戴好防护用品,以免被阳性样品 污染而导致感染。 2.试验完毕后,脱下防护用品,用肥皂或者消毒 液及流水洗手,最后对实验工作区域和工作台 面进行消毒。 3.送标本时应防止对工作人员造成感染或对环境 造成污染。护送样品的人应明确接收地点和接 收人,实验室负责人或其指定的人员应及时确 认样品已送达指定实验室,被转入安全位置并 得到妥善处理。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝表抗及乙肝五项检测 五、职业暴露后的预防 1.急救处理:如粘膜污染,用生理盐水或者流水冲洗 ;如针刺伤的要尽可能把血挤出来,然后用肥皂 或者消毒液及流水洗手,最后涂上酒精,包扎伤 口。 2.在暴露后24h内注射HBIG,以预防HBV感染。 六、试验废弃物的处置和消毒 1.废弃物的处置应符合《实验室生物安全通用要求 》(GB19489-2004)和《消毒技术规范(2002 年版)》要求。 2.能够灭活HBV的常用方法和条件包括:121℃高 压蒸汽灭20min,160℃干烤1h,100℃煮沸> 2min, 0.5﹪ 过氧乙酸,3﹪ 漂白粉,5﹪ 次氯酸钠 和环氧乙烷。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察 一、孕妇产前乙肝病毒标志物筛查 1.对2011年1月1日---6月30日所有住院分娩孕妇 分娩前进行HBsAg筛查(填附表1),检测试 剂和方法根据各医院的实际需要自由选择。 2.如果孕妇HBsAg筛查结果为阳性,则进一步检 测HBeAg、抗-HBe和抗-HBc,检测试剂和方 法根据各医院的实际需要自由选择。 3.采集HBeAg阳性的孕妇的静脉血3ml,将血清 分离后冻存,统一送省CDC采用Abbott检测试 剂进行乙肝五项血清学指标的实验室复核和 PCR定量HBV DNV检测。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察 二、HBsAg阳性母亲所生新生儿乙肝疫苗免疫策 略 1.乙肝疫苗接种:HBsAg阳性母亲所生新生儿按 照0,1,6m程序接种10ug重组酵母。 2.HBIG的使用:HBsAg阳性母亲所生新生儿出生 后24h内尽早注射一针100IUHBIG。如果HBIG 短缺,可优先接种HBsAg和HBeAg双阳性的母 亲所生新生儿。 3.HBIG和首针乙肝疫苗接种时间越早越好,可 同时在不同部位接种。 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 开展乙肝疫苗母婴阻断效果观察 三、HBsAg阳性的母亲所生新生儿母婴阻断效果 观察 调查201 1年1月1日—6月30日所有住院分娩 的HBsAg阳性孕妇及新生儿的信息,建立档案 ,定期随访。所有HBsAg阳性母亲所生婴儿在 完成乙肝疫苗全程免疫后7-12月内采静脉血 3ml,血清分离后,各分两管保存,一管在县 CDC进行“乙肝五项”血清学指标检测,另一 管统一冻存,送省CDC采用Abbott检测试剂进 行实验室复核。(填写附表2、附表3) and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 住院分娩产妇和新生儿乙肝疫苗登记表1 and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝疫苗母婴阻断个案调查表(附表2-1 ) and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝疫苗母婴阻断个案调查表(附表2-2 ) and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝疫苗母婴阻断个案调查表(附表2-3 ) and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 母婴阻断标本送检表(附表3) and Hyperthermia Associated with Poisoning or and Neonatal Respiratory Care Embryologic Development Births Obstetric Emergencies 乙肝免疫学检测 谢谢谢谢!!
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