• / 42
  • 下载费用:10 金币  

抗菌药物敏感性试验及2010CLSI

关 键 词:
抗菌药物敏感性试验及2010CLSI 抗菌药物敏感性试验 2010抗菌药物敏感性试验 抗菌药物敏感性试验和 试验及2010 CLSI抗菌药物敏感性试验
资源描述:
药敏试验及2010年CLSI更新 华中科技大学同济医院 朱旭慧 细菌耐药性变迁—G+ ¨金葡菌 MRSA VISA VRSA CA-MRSA ¨青霉素不敏感肺炎链球菌 PISP PRSP ¨耐万古肠球菌 VRE(vanA vanB vanC) ¨肠杆菌科细菌 大肠、肺克、奇异变形杆 菌产ESBLs,AmpC酶等 ¨大肠埃希菌-耐FQ ¨耐第三代头孢、碳青霉烯类革兰阴性杆菌 ¨多重耐药及泛耐药菌-不动杆菌属、绿脓 、肠杆菌科细菌中的某些种 细菌耐药性变迁—G - 细菌药敏试验的重要性 ¨细菌耐药性仍呈增加趋势 ¨加强对耐药菌的检测、耐药菌带菌者的筛 查和耐药机制研究 ¨正确合理选用抗菌药和控制耐药菌感染 正确的药敏试验及报 告非常重要! 如何进行药物敏感性试验? ¨纸片扩散法 – Kirby-baure(K-B)法) ¨稀释法 – 试管稀释法(肉汤稀释法 – 平板稀释法(琼脂稀释法) ¨E-Test 细菌报告应注意的问题 ¨有无细菌:苛养菌、难培养细菌 ¨正常菌群/病原菌:病史、病人体征、感染部位 ¨药敏结果报告:耐药菌株的提示或修改 ¨完全抑制的抑菌圈直径,包括纸片的直径 ¨不反光的黑色背景、反射光下阅读结果 ¨抑菌圈的界限应该是以肉眼观察没有明显 的可见细菌生长区域 ¨在抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大镜 下才能观察到的细小菌落应忽略 正确阅读纸片法结果 正确阅读抑菌圈内的“霾”现象 ¨ 变形杆菌(迁移生长)以及磺胺类药物的纸片法药敏 注意要读 完全抑制的抑菌圈,对“霾”生长不予理会 ¨ 克林霉素对葡萄球菌的抑菌圈内如有薄雾状菌苔应报告细菌 对克林霉素耐药,不管其是否显示 “D”抑菌圈 ¨ 需在透射光(Transmitted light)下阅读万古霉素、利奈唑胺 和苯唑西林的抑菌圈,遇不敏感的结果需用稀释法测定MIC 法确证 E-test试验结果阅读 忽略溶血,读取生长完全被抑 制处 MIC 0.032ug/ml 杀菌型药物如氨基糖苷类产 生“干脆利落”椭圆球 MIC 0.064ug/ml 试条两边产生不同的交界点 ,读取较高数值侧的MIC。 如果两侧差>1个稀释度,则 须重复试验。 MIC 0.5ug/ml 忽略变形杆菌的迁延现象 ,MIC 0.064ug/ml 哪些需要做MIC ¨ 肺炎链球菌 苯唑西林纸片法直径≤19mm,需要明 确受试菌对青霉素的敏感性,必须做青霉素的E- 试验 ¨ 革兰阳性球菌 万古霉素不敏感时(中介或耐药 ),必须做万古霉素的E-试验确认受试菌对万古 霉素的敏感性(包括替考拉宁、利奈唑胺等) ¨ 草绿色链球菌 对青霉素、氨苄西林 纸片法药敏结果不可靠,必须做上述 两药的E-test 葡萄球菌:某些情况下,对万古霉素 纸片法的分辨率低 Clinical Infectious Diseases 2007; 44:1536–42 万古霉素的MIC方法为常规药敏试验的方法 2009 2008 2009年取消了万古霉素对葡萄球菌纸片法药敏 增加万古霉素剂量不能改善临床疗效 大剂量万古霉素治疗医院获得性MRSA感染, MIC=2µg/mL仍导致高治疗 失败率 Hidayat LK et al. Arch Int Med. 2006;166:2138-2144. 一项单中心、前瞻性研究,对95例罹患医院MRSA感染的住院或住护理院的老年患者静脉滴注万古霉素,对临床疗效、死亡率、肾毒性 进行评价 *到达目标:万古霉素血浆谷浓度达到15-20µg/mL;†治疗反应:患者发热、白细胞增多症状部分或完全缓解 0% 20% 40% 60% 80% 100% 治疗反应 †(%) P=0.02 85% 62% 总体 MIC ≤1MIC=2 到达目标*未到目标 耐青霉素肺炎链球菌的检测 ¨苯唑西林:1ug/片 ¨抑菌圈直径≥20mm为青霉素敏感株( MIC≤0.06ug/ml ) ¨抑菌圈直径≤19mm可能为青霉素耐药、中敏 或敏感株,必须进行青霉素MIC测定。 肺炎链球菌对青霉素药敏试验的判断标准 (mcg/ml) 2008版! M100-S18 Table 2G敏感 中介 耐药 青霉素(非脑膜炎)≤248 青霉素(脑膜炎) ≤0.06-0.12 青霉素(口服青霉素 V) ≤0.060.12-12 2007版 ! M100-S17 Table 2G 青霉素 ≤0.060.12-12 对于三个青霉素的判断标准我们都应该解 释和报告吗? 青霉素判断标准 解释/报告? 脑膜炎 • 是的,脑脊液标本 非脑膜炎 • 是的,其他的标本,因为我们通常不 能确定该感染是否涉及脑膜 口服青霉素V • 可能不需要,如果你们实验室不用口 服青霉素(阿莫西林经常被用做口服 青霉素的首选) 不可能出现的药敏结果 同一株细菌不可能出现的矛盾的药敏结果 ¨金葡菌:青霉素S,苯唑西林R;万古霉素R ¨肠球菌:万古霉素S,替考拉宁R ¨肠杆菌科细菌:第三代头孢菌素R,第二、 第一代S CLSI附录E(Appendix E)指出的少见或 罕见的结果 如遇到上述菌株必须重新鉴定细菌和药敏! 2010CLSI主要更新内容 ¨肠杆菌科相关的更新 ¨葡萄球菌属相关的更新 ¨其他菌种相关的更新 ¨表1和表2介绍内容中的更新 2010CLSI主要更新内容 ¨主要格式的更新 ¨关于药敏质控的更新(新增Doripenem等质控范围) ¨关于药敏试验操作的更新 ¨脆弱拟杆菌的累积药敏报告 ¨术语表的更新(新的抗生素亚组-抗MRSA活性的头孢菌素) 肠杆菌科新旧折点(MIC ug/l) AgentCLSI M100-S19CLSI M100-S20 SIRSIR 头孢唑啉≤816≥32≤ 12≥4 头孢噻肟≤ 816-32≥64≤ 12≥4 头孢唑肟≤816-32≥64≤ 12≥4 头孢曲松≤ 816-32≥64≤ 12≥4 头孢他啶≤ 816≥32≤ 48≥16 氨曲南≤ 816≥32≤ 48≥16 肠杆菌科新旧折点(纸片扩散法,mm) AgentCLSI M100-S19CLSI M100-S20 SIRSIR 头孢唑林*≥ 1815-17≤ 14NANANA 头孢噻肟≥ 2315-22≤ 14≥ 2623-25≤ 22 头孢唑肟≥ 2015-19≤ 14≥ 2522-24≤ 21 头孢曲松≥ 2114-20≤ 13≥ 2320-22≤ 19 头孢他啶≥ 1815-17≤ 14≥ 2118-20≤ 17 氨曲南≥ 2216-21≤ 15≥ 218-20≤ 17 *纸片扩散法折点标准还未建立 CLSI M100CLSI M100--S20. Table 2A. 已评估但未修正的肠杆菌科药敏折点 药物CLSI M100-S20(2010) SIR 头孢呋辛( 非口服) ≤816≥32 头孢吡肟≤816≥ 32 头孢替坦≤1632≥ 64 头孢西丁≤816≥ 32 CLSI M100CLSI M100--S20. Table 2A. 为什么CLSI降低了头孢菌素及氨曲南的折点 ¨以前的折点标准建立于20年前(ESBLs以前) ¨老的和新的β-内酰胺酶耐药机制等相关知识 的增加 --ESBL问题的复杂化;多种酶导致ESBL检测的准确性降低 ¨新的建立折点标准工具的出现 --PK/PD知识的增加 为什么头孢唑啉没有纸片扩散法折点? ¨修订的MIC折点与相关的抑菌圈直径标准尚未确 立 ¨需要进一步的研究 ¨可能需要使用一种改变含药剂型的新型纸片 ESBLs检测(1) ¨最初的建议*是基于: --研究观察到某些产ESBLs菌株,药物的MICs有 升高但仍然在敏感区(旧折点) --有限的临床观察发现,对于产ESBLs菌株引起的 感染,病人预后差。 ESBLs试验建议是处理一个新型耐药机制 的短期解决方案 ESBLs检测(2) •多重耐药机制的出现可能会使ESBL确证实验受阻 ----ESBL+AmpC ----ESBL+孔蛋白突变 • ESBLs产生于肠杆菌科细菌,而不仅仅是大肠埃希菌、克雷 伯菌属和奇异变形杆菌,对于其他的菌株确证实验则存在许多 问题 与“R”机制相比,MIC与临床预后具有更好的相关性。 CLSI ESBL 检测建议 以往的折点M100-S19修订后的折点M100-S20 临床报告 ESBL初筛及确证试验YesNo 头孢菌素类、青霉素类和氨曲 南等药物将“S”修改为“R” YesNo 感染控制和流行病学调查 ESBL初筛及确证试验Yes,假如需要的话Yes,假如需要的话 头孢菌素类、青霉素类和氨曲 南等药物将“S”修改为“R” YesNo 未被CLSI重新评估的折点 头孢孟多 头孢尼西 头孢哌酮 拉氧头孢 ¨在USA这些药物通常是不可行的或为被使用 ¨假如使用这些药物的话,我们必须继续在大肠埃希 菌、克雷伯菌属和变形杆菌中做ESBL初筛及确证实 验 --ESBL阳性,将头孢菌素类、青霉素类和氨曲南等药物 “S” 修改为“R” MRS的结果报告原则 ¨MRSA和MRCNS菌株对β-内酰胺类药物,如青 霉素类、 β-内酰胺/ β-内酰胺酶抑制剂、 头孢类(除外新型的有抗MRSA活性的头孢菌 素,如Ceftaroline 、Ceftobiprole )以及 碳青霉烯类体外敏感但临床无效,均需报告 为耐药 葡萄球菌属相关的更新葡萄球菌属相关的更新 增加的…MRSA的定义 “MRSA是指表达mecA基因或其它甲氧西林耐药机制 (如青霉素结合蛋白对苯唑西林亲和力改变等)的金 黄色葡萄球菌 CLSI M100CLSI M100--S20. pp. 60 MRSA=表达mecA基因 和/或 苯唑西林MIC2 μg/ml 金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌检测苯 唑西林(OX)和头孢西丁(FOX) “头孢西丁被作为苯唑西林耐药的替代药物; 报告苯唑西林敏感或耐药是基于头孢西丁的 结果。假如头孢西丁和苯唑西林都被用于测 定金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌,那么两 种药物中任一种耐药,该菌株即应被报告为 对苯唑西林耐药。” CLSI M100CLSI M100--S20. pp. 62. 金黄色葡萄球菌或路登葡萄球菌检测苯 唑西林(OX)和头孢西丁(FOX) OXFOX耐药机制相对流行率 OX报告 SSNone一般S RRmecA一般R RSmecA(低水平表达)少见R* SRPBP改变或β-内酰胺 酶的高表达(模糊的 MRSA) 罕见R* 葡萄球菌属:诱导性β-内酰胺酶试验 青霉素 – MIC≤0.12mg/L – 抑菌圈直径≥29mm 诱导性β-内酰胺酶试验 对于严重感染,随后分离出的菌株,实验室应进行 青霉素的MIC检测和β-内酰胺酶诱导试验 β-内酰胺酶的诱导试验 苯唑西林 (诱导剂) •菌种划线(BAP、MHA) •贴β-内酰胺类纸片(OXA、FOX) •过夜培养 •检测抑菌圈边缘的菌落 葡萄球菌属葡萄球菌属 青霉素青霉素 MIC≤0.12mg/LMIC≤0.12mg/L 抑菌圈直径抑菌圈直径≥ ≥29mm29mm 葡萄球菌属-D试验 ¨ 15~26mm ¨ erm 基因编码的23S rRNA 甲基化 ¨ 报告评论: “由于克林 霉素诱导耐药试验阳 性,推测此菌株对克 林霉素耐药,但在少 数患者治疗中克林霉 素可能仍有效”。 修订的建议… Re:万古霉素MIC,什么时候葡萄球菌应该被 送到一个参考实验室做进一步检测? §金黄色葡萄球菌 ---MIC 4μg/ml—Maybe ---MIC≥8μg/ml—Yes §凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS) --- MIC≥32μg/ml—Yes 葡萄球菌属—利奈唑胺 增加的…“R”折点 方法CLSI M100-S19 (2009) CLSI M100-S20 (2010) SIRSIR MIC(ug/ml)≤4--≤4-≥8 抑菌环直径(mm)≥21--≥21-≤20 ♦对利奈唑胺不敏感的的金葡较少,占0.05%(7/15280)。 CLSI agenda book June 2009 ♦耐药机制已被识别 ---rRNA突变和cfe基因介导的耐药(其可被质粒编码) Mendes et al. 2008. Antimicrob Agents Chemother. 52:2244. β-溶血性链球菌组群 ¨青霉素“S”可预报 所 列β-内酰胺药物的 结果 ¨适用于β - 溶血链球 菌(大菌落) CLSI M100CLSI M100--S20. pp. 93. 删除的…链球菌属 草绿色链球菌青霉素结果的外推 “(5)对青霉素敏感的链球菌可认为其对 氨苄西林,阿莫西林,氨苄西林,阿莫 西林,阿莫西林-克拉维酸,阿莫西林- 舒巴坦,头孢克罗,头孢唑林,头孢地 尼,头孢吡肟,头孢丙烯,头孢噻肟, 头孢布烯(仅A群),头孢曲松,头孢 呋辛,头孢泊肟,头孢拉定,头孢唑肟 ,头孢噻吩,头孢匹林,亚胺培南,厄 他培南,氯碳头孢和美罗培南敏感,不 需要测定这些药物” CLSI M100CLSI M100--S19S19. pp. 81. 为什么注释re被删除:从草绿色链球菌的青 霉素结果外推其他的β-内酰胺类药物结果 ¨ 尽管罕见,但已证实青霉素和头孢菌素类药物之间缺乏交叉敏感性。 ¨ 近来的交叉敏感性数据不多。 ¨ 许多草绿色链球菌对β-内酰胺类药物不敏感。 ¨ 大多数草绿色链球菌AST检测来自于严重的感染,需要测定MIC值,需要可 靠的数据。 草绿色链球菌包括以下5个菌群,每个菌群包含几个菌属;可变链球菌、唾液链球菌、牛链球菌 群、咽峡炎链球菌群(以往的米勒链球菌)和mitis链球菌群。咽峡炎链球菌群包括小菌落A 、F、G群和β溶血链球菌 脑脊液分离菌株不能常规报告的药物 口服抗菌药物 一、二代头孢菌素(除外静脉用头孢呋辛) 克林霉素 大环内酯类 四环素、氟喹诺酮 头霉素类(如头孢西丁、头孢美唑和头孢替坦) Thanks for your attention!Thanks for your attention!
展开阅读全文
  麦档网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
0条评论

还可以输入200字符

暂无评论,赶快抢占沙发吧。

关于本文
本文标题:抗菌药物敏感性试验及2010CLSI
链接地址:https://www.maidoc.com/p-15714298.html

当前资源信息

wendan****obaike

编号: 20180902020115870671

类型: 共享资源

格式: PPT

大小: 6.40MB

上传时间: 2019-11-12

关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

[email protected] 2018-2020 maidoc.com版权所有  文库上传用户QQ群:3303921 

麦档网为“文档C2C模式”,即用户上传的文档所得金币直接给(下载)用户,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的金币归上传人(含作者)所有。
备案号:蜀ICP备17040478号-3  
川公网安备:51019002001290号 

本站提供办公文档学习资料考试资料文档下载


收起
展开