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抗菌药物敏感试验及细菌耐药性检课件

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抗菌 药物 敏感 试验 细菌 耐药性 课件
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药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n抗菌药物敏感性概述 n抗菌药物敏感性试验方法 n全国 细菌耐药监测网 简介 1 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 敏感和耐药的概念 n从本质上讲 细菌对某种抗菌药物是敏感还是耐 药 常以该抗菌药物的治疗浓度与MIC的关系而 定 常用剂量的抗菌药物通过常 用途径所能达到的血药浓度 2 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 血药浓度与MIC之间的关系 敏感 中介耐药 耐药 上限 下限 3 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 抗菌药物的治疗浓度与MIC的关系 n若MIC小于治疗浓度 则为 敏感 Sensitive S 推荐使用 n若MIC大于治疗浓度 则为 耐药 Resistant R n若MIC介于治疗浓度的上下限之间 则为 中度耐药 Intermediate I 或中度敏感 敏感和耐药的概念 4 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 5 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 敏感 治疗浓度的上限 即表中的 R 治疗浓度的下限 即表中的 S 耐药 中介耐药 治疗浓度 CLSI标准 MIC 6 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 第一节 抗菌药物敏感性试验方法 需氧和兼性厌氧菌 7 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n稀释法 肉汤稀释法 试管稀释法 琼脂稀释法 平板稀释法 n纸片扩散法 纸片法 nE 试验 n联合药物敏感试验 需氧和兼性厌氧菌药敏试验的方法 8 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 稀释法的特点 n定量的药敏试验 测定MIC MBC n方法比较繁琐 手工操作一般不作为常规试验 常用于调查罕见耐药 n自动微生物鉴定药敏分析系统采用微量稀释法 检测MIC 9 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 二 纸片扩散法 disc diffusion test Kirby Bauer法 原理 n将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有测试菌的琼脂平 板上 抗菌药物向琼脂四周扩散形成递减的梯度 浓度 n药物敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受到 抑制 形成抑菌圈 n抑菌圈的大小反映测试菌 对药物的敏感程度 二者呈正相关 10 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 抑菌圈边缘的药物浓度 与 MIC 11 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 抑菌圈的大小与MIC n二者呈负相关 即抑菌圈愈大 MIC愈小 12 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 纸片法药敏试验抑菌圈直径与结果解释的标准 抗菌药物与细菌 纸片含量 抑菌圈直径 mm 相应MIC g ml 耐药 中介度 敏感 耐药 敏感 丁胺卡那霉素 30 g 14 15 16 17 32 16 氨苄青霉素 测肠杆菌 10 g 11 12 13 14 32 8 测葡萄球菌 10 g 28 29 测嗜血杆菌 10 g 19 20 4 0 25 测肠球菌 10 g 16 16 2 13 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 操作方法 1 制备M H琼脂平板 厚度4mm 2 制备0 5麦氏比浊管浊度的菌液 培养16 24h 4 5个菌落 3 菌液均匀涂布于平板 15分钟接种完毕 4 无菌贴标准抗生素纸片于M H琼脂表面 5 经过35 16 24h孵育 6 量取抑菌环直径 根据CLSI标准 报告细菌对该抗生素敏感 耐药 中介 14 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 操作方法 1 将在约56 恒温的无菌M H琼脂倾注直径为90mm 的平板 其厚度 4mm 15 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 2 无菌挑取孵育16 24h的血平板上4 5个菌落 16 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 3 将菌置于无菌生理盐水中 校正其浊度于 0 5麦氏比浊管浊度的菌液 1 5 108CFU ml 17 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 4 用无菌棉签浸入细菌悬 液中 将拭子在试管上壁 轻轻挤压以挤去过多的菌 液 棉签在三个方向均匀 抹琼脂表面 每次转60 使菌液均匀分布 最后 沿平板内缘涂抹一周 18 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 5 盖上平板的盖子 放置培养箱内孵育 放置 3 10分钟后贴上标准抗生素纸片 19 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 6 用无菌镊子或纸片分配器将抗菌纸片粘贴于M H琼脂 的表面 一旦纸片贴上 不能移动 各抗菌纸片中 心距离应大于24mm 纸片距平板内缘应大于15mm 20 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 7 经过35 16 24h孵育 8 取抑菌环直径 根据CLSI标准 报告细菌对 该抗生素敏感 耐药 中介 21 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 纸片扩散法质量控制 n 培养基 M H平板厚度 4 mm n细菌悬液 0 5麦氏标准的细菌浓度 n药敏纸片的质量 n各抗菌纸片中心距离应大于24mm 纸片距平板内缘应大于15mm 9cm的平板贴6个 n培养时间 n质控菌株 抑菌圈直径 22 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 23 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n根据抑菌圈的直径 依照CLSI标准 作出敏感 耐药 和中介的判断 为 定性 结果 nCLSI推荐的最简单的药敏试验 纸片扩散法的特点 24 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 三 E试验法 浓度梯度法 原理 nE试条是一条5mm 50mm无孔试剂载体 一面固定有 一系列预先制备的浓度呈连续指数增长的抗菌药物 另一面有判别的刻度 抗菌药物的梯度可覆盖有 15 20个对倍稀释浓度的宽度范围 n将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上 经孵育 围 绕试条明显可见椭圆形抑菌圈 圈的边缘与试条交 点的刻度浓度即为抗菌药物抑制细菌的MIC n依照CLSI标准判断其敏感 耐药 中介 256 128 8 016 25 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 无菌生长区 有菌生长区 26 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 椭圆形细菌 生长抑制区 256 128 8 016 判读抑菌浓度 MIC ug ml 27 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 28 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 29 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 E test 法特点 n优点 q连续浓度梯度 与琼脂稀释法相关性好 相关系数为0 9 可测MIC q操作简单 影响因素少 稳定性高 n缺点 E试条较昂贵 不适用于生长缓慢的苛养菌 30 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n用于病原菌尚未确定的急 重症感染的经验治 疗 以扩大病原治疗的覆盖面 n治疗多种细菌所引起的混合感染 n对于某些耐药菌可取得协同抗菌作用 n减少或推迟治疗过程中细菌耐药性的产生 n避免药物达到毒性剂量 四 联合药物敏感试验 联合药物意义 31 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n增强作用 两种抗生素联用的效果大于它们单 独使用时的效果之和 20 25 n相加作用 它们联用时的效果等于单用两种抗 生素效果之和 60 70 n无关作用 两种抗生素联用的效果 仅相当于 其中一种具有较强作用的抗生素的效果 n拮抗作用 两种抗生素联用时的效果反而小于 它们分别使用时的效果之和 10 15 两种药物的联合使用的效果 32 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 两种抗菌药物作用部位不同 n 内酰胺类抗生素 抑制细菌细胞壁合成 与 氨基糖苷类抗生素 干扰细菌的代谢 增强作用 增加了药物进入细菌细胞 n杆菌肽 降低细胞通透性 与氨基糖苷类药物 干扰细菌的代谢 拮抗作用 降低了药物进入细菌细胞 抗菌药物协同作用发生原理 33 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n棋盘稀释法 利用肉汤稀释法原理 依据两种药物的MIC 以棋盘设计两种药物不同浓度的组合 n计算抑菌浓度指数 fraction inhaibitory concentration FIC 联合药物敏感试验方法 34 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 棋盘稀释法 n首先分别测定拟联合的抗菌药物对检测菌的MIC n药物最高浓度为MIC的2倍 对倍稀释 n两种药物的稀释分别在方阵的纵列和横列进行 这样在每管 孔 中可得到不同浓度组合的两种 药物混合液 n接种菌量为5 105CUF ml 35 孵育18h后观察 结果 n计算部分抑菌浓度 FIC 指数 35 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 抑菌浓度指数 FIC FIC FIC A药联合时的MIC A药单测的MIC B药联合时的MIC B药单测的MIC FIC 0 5为协同作用 0 5 1为相加作用 1 2为无关作用 2 为拮抗作用 36 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 A药 32 16 8 4 B药 16 8 4 2 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生长 生长生长 生 长 37 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 药敏试验方法的比较 nK B法 WTO推荐使用的最简单的定性药敏 试验 n稀释法 准确测定MIC MBC 比较繁琐 试管法一般不作为常规试验 微生物自动分析系统采用微量稀释法原理 nE试验 可测定MIC 38 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 第二节 结核分枝杆菌的药敏试验 了解 n首次分离的分枝杆菌需做药敏试验 有助于 合理用药和监测药物敏感性 n另外经过三个月正规治疗 标本分离培养仍 为阳性患者 或感染的严重疾患 如播散性 结核病和结核性脑膜炎 n以及来自高耐药流行区的患者 均须做体外 药敏试验 39 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 四种方法 n比例法 n放射同位素法 n绝对浓度法 n耐药率法 直接法 直接采用图片阳 性的体液标本 须经充 分消化五杂菌 间接法 经分离纯培养后 的次代培养菌 40 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 无药 药2药3 药1 nMiddlebrook7H10琼脂 n培养3周 间接比例法 WHO推荐 敏感 含药格无结核杆菌生长 或菌落数 1 对照格 耐药 含药格菌落数 1 对照格 不含药的对照格菌落数应为50 150 4 格平板 41 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 分枝杆菌微量直视 快速药敏试验法 4000 倍 42 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 培养72h观察结果 INH敏感RFP耐药 阳性对照 阴性对照 43 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 第三节 厌氧菌体外药敏试验 了解 n厌氧菌感染多为内源性感染 厌氧菌药物敏感性稳 定 一般不做体外药敏试验 n下述情况应考虑药敏试验 明确厌氧菌引起的严重感染 已确证的厌氧菌感染 经验性选药治疗未能奏效 需长期用药的厌氧菌感染 44 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n基本原理和方法与需氧菌相同 只是在培养基 操作环境和培养条件等应根据厌氧菌的特定 需要变动 n培养基为布氏血琼脂再加人补充剂 5 g ml氯 化血红素 5 脱纤维羊 1 g ml Vit K n厌氧孵育条件 n质控菌株为脆弱类杆菌ATCC25285 厌氧菌体外药敏试验 45 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 药敏试验结果的临床价值 n影响抗菌药物临床疗效的因素很多 据报道药 敏试验结果与临床疗效的符合率约为70 n因此细菌培养及药敏试验报告只能作为临床用 药的参考 应根据患者用药后的治疗反应和临 床病情及时调整用药 n医学检验的灵魂是与临床沟通 46 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 新的药敏试验方法探索 n流式细胞术检测抗生素最低抑菌浓度 n分枝杆菌药物最低抑菌浓度的快速测定 方法研究 47 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 细菌耐药性的发生过程 细菌获得与耐药相关的基因 编码与耐药有关的蛋白 表现出对某种抗生素的耐药 基因 537 表型 书533页 敏感性 48 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 第35章第三节 细菌耐药性检测 49 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n生物化学技术检测酶的等电点 等电聚焦电泳 n头孢哨噻吩滤纸片法 n碘淀粉测定法 n分析酶的底物谱及抑制物谱 纸片法和稀释法 1 内酰胺酶检测 临床意义 产ESBL克雷伯菌和大肠埃希菌 对青霉素 头孢菌素和氨曲南治疗无效 一 耐药表型检测 50 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 G 菌产生的头孢菌素酶检测 头孢哨噻吩滤纸片法 n用接种环挑取受试菌于头孢哨噻吩 产色头孢 菌素 滤纸片上 商品化 n10分钟内由浅黄色转变为粉红色即阳性结果 表示头孢菌素的 内酰胺环被酶打开 n临床意义 产生该酶的细菌对头孢菌素类抗生 素耐药 51 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 G 菌产生的青霉素酶检测 碘淀粉测定法 受试菌混于青霉素溶液 振摇30分钟 加入淀 粉液后 再加入碘液 溶液变蓝 继续振摇 10分钟之内蓝色消失者为产酶株 青霉素酶 青霉素 青霉素噻唑酸 碘 碘淀粉复合物 变为无色 多为金黄色葡萄球菌产生 对青霉素G耐药 52 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 超广谱 内酰胺酶 Extended Spectyum Lactamase ESBL ESBLs n能水解青霉素类 头孢菌素和氨曲南 不能水解碳青烯酶类 如亚胺培南 n多数可被 内酰胺酶抑制剂 如克拉维酸 三 唑巴坦及舒巴坦 所抑制 n如为ESBL阳性 则对青霉素类 头孢菌素和氨 曲南均报告耐药 不考虑体外药敏结果 53 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 常见产ESBLs菌株 n最常见是肠杆菌科细菌 大肠埃希氏菌 肺 炎克雷伯氏菌 n其次 阴沟肠杆菌 粘质沙雷氏菌 弗劳地 枸橼酸菌 铜绿假单胞菌 奈瑟菌等 54 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 ESBLs的临床意义 n对产ESBLs菌株 目前最有效的抗生素为碳 青霉烯类 泰能 其次 头孢西丁及含酶抑 制剂的复合剂 氨基糖甙类部分有效 n若临床出现产ESBLs菌株 会在病人和医院 之间及不同菌株间相互传播 应引起充分的重 视 55 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 纸片初筛 n培养基 Muller Hinton琼脂 n药敏纸片 n接种 按标准纸片扩散法 n孵育 35 大气环境 16 18小时 n结果 头孢泊肟 10ug 片 抑菌环 22mm 头孢他啶 10ug 片 抑菌环 22mm 氨曲南 30ug 片 抑菌环 27mm 头孢噻肟 30ug 片 抑菌环 27mm 头孢曲松 30ug 片 抑菌环 25mm 超 内酰胺酶检测纸片扩散法 ESBLs 的底物 可能产生 ESBLs 56 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n培养基 Muller Hinton琼脂 n药敏纸片浓度 头孢噻肟30ug 头孢噻肟 克拉维酸30ug 10ug 头孢他啶30ug 头孢他啶 克拉维酸30ug 10ug n接种 按标准纸片扩散法 n孵育 35 大气环境 16 18小时 n结果 复合制剂药物纸片的抑菌圈直径 比非复合制剂药物纸片的直径 5mm 以上者为产ESBLs菌 ESBLs的底物 ESBLs的抑制剂 1 纸片确证试验 57 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 混合克拉维酸药物 纸片 无克拉维酸药物纸 片的直径 直径差 5 mm ESBL 58 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 筛选试验 n选用头孢泊肟 头孢他啶 氨曲南 头孢噻肟或 头孢曲松至少2种以上 n用标准肉汤稀释法稀释至1 g ml n凡被测菌在上述各管中能够生长 MIC 2 g ml 高度怀疑为ESBLs 应进一步作确认试验来加 以确诊 2 液体稀释法 59 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 确认试验 n用标准肉汤稀释法测定MIC的方法 n头孢噻肟单独稀释 0 25 64 g ml 及 头孢噻肟 稀释范围相同 加克拉维酸 每管4 g ml 头孢他啶单独稀释 0 25 128 g ml 及 头孢他啶加克拉维酸 每管4 g ml 上述2种药物必须同时进行试验 n结果加克拉维酸和不加克拉维酸的 MIC差值 8倍 3个稀释度 可确认为ESBLs菌株 2 液体稀释法 60 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 二 细菌耐药基因检测 n基因检测方法检测细菌耐药性的优缺点 n抗生素耐药性的基因检测方法 n基因检测方法的应用 61 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 基因检测细菌耐药性的优点 n能早期指导临床医生治疗用药 分子遗传学方法可以直接从临床标本入手 无需 菌株的培养 极大地节省时间 减轻实验室生物危险性 n有助鉴别那些处于中介水平或常规药敏结果模棱 两可的结果 分子生物学方法被认为是 金标准 n在细菌耐药性的流行病追踪调研中 耐药基因检 测比抗生素敏感方法更准确 n发现新的耐药基因 62 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 基因检测方法检测抗生素耐药性的缺点 n当样品中菌量很少时 其敏感性会大大降低 n对每一个测试的抗菌药物 均需要设计相应的分 子检测方法 一次只能检测一种耐药机制 n目前仍有许多耐药机制是未知的 无法进行分子 检测 n耐药基因的检测也会存在假阳性问题 n对许多耐药基因的检测方法 目前还缺乏临床对 照研究以评价其准确性 重复性及临床应用价值 63 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 常见的细菌耐药相关基因举例 基 因耐药抗生素细菌种类基因大小bp Ant 4 氨基糖苷类金黄色葡萄球菌473 ant 6 la 氨基糖苷类粪肠球菌470 mec A 内酰胺类金黄色葡萄球菌400 blaTEM 一内酰胺类大肠埃希菌424 cat D氯霉素艰难杆菌270 64 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 耐药基因检测方法 n分子方法检测耐药基因的基础是 PCR n在 PCR基础上发展的方法 分子杂交 DNA序列分析 基因微振列技术等 65 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 PCR 序列特异性引物扩增耐药基因 标标 本本 提取提取 DNADNA PCRPCR扩增目扩增目 的基因的基因DNADNA 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳结果分析结果分析 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 耐药基因的的 特异性引物 n理想的靶序列应当是耐药基因的编码区域 而非编码区外 的基因 如插入序列或启动子序列 n特异性高 需要设立阴性对照 66 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 基因芯片技术 n芯片制备 以玻璃片或硅片为载体 采用原位合成和微矩 阵的方法将寡核苷酸片段或cDNA作为探针按顺序排列在载 体上 n样品制备 生物样品往往是复杂的生物分子混合体 须将 样品进行提取 扩增 获取其中的蛋白质或DNA RNA 然 后用荧光标记 以提高检测的灵敏度和使用者的安全性 n杂交反应 即荧光标记的样品与芯片上的探针进行反应产 生一系列信息的过程 n信号检测和结果分析 杂交反应后的芯片上各个反应点的 荧光位置 荧光强弱经过芯片扫描仪和相关软件可以分析 图像 将荧光转换成数据 即可以获得有关生物信息 67 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 结核菌耐药基因突变检测液芯 68 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 细菌耐药监测网 简介 监测从住院 门诊病人分离的细菌耐药状况 分析住院病人抗菌药物的使用情况和门诊药品的 使用情况 系统 连续地收集资料 定量分析 报告抗菌药 物敏感性 耐药性的发生和分布 为制定 评估诊 疗指南 如经验性治疗方案 感染控制措施等 提 供有用信息 69 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 70 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 网上细菌耐药检测检索 71 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 广东医学院附属医院细菌耐药性分析 n2009年上半年我院细菌培养耐药性分析 n2009年上半年全院各类标本主要病原菌的耐药 性 痰标本主要病原菌的耐药性 尿标本主要病原菌的耐药性 血液标本主要病原菌的耐药性 n多重耐药菌株医院感染监控制度 临床科室更加直观地对自己科室感染细菌 的耐药性情况有直接的了解 某一科室 主要病原菌的耐药性 某类标本主要病原菌的耐药性 某一细菌的耐药情况 细菌耐药性分析趋势 72 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 细菌耐药 小结 n举例说明抗菌药物的作用机制 n举例说明细菌耐药的生化机制 分析抗菌药物的作用及细菌对抗菌药物 耐药的相关性 n简述 内酰胺类抗生素的杀菌机制及细 菌对该类药物的耐药机制 BPPESBLs 73 药物支架与冠状动脉搭桥手术治疗冠心病多支病变疗效对比2010 届高考生物第一轮复习专题课件第五单元生物的遗传变异与进化这就是生命中唯一的财富活过并经历痛苦能做到这一点也就 n细菌获得性耐药产生的机制 基因突变 获得外源基因 n说明质粒 整合子 转座子在细菌耐药播散中 的作用 n药物敏感试验的意义 方法及特点 n联合用药可能出现的结果 n质量控制 n解释名词 AST MIC MBC S R I Tn 74
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本文标题:抗菌药物敏感试验及细菌耐药性检课件
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