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%a9菌肥对怀地黄连作障碍修复机制研究.pdf

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a9 菌肥 地黄 连作 障碍 修复 机制 研究
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湖南农业科学2 0 0 8 ,( 5 ) :6 2 ~6 5H u n a nA g r i c u l t u r a lS c i e n c e s复合微生物茵肥对怀地黄连作障碍修复机制研究李自刚- 2 , 3 ,王新民比,刘太宇1 2 ,张晓根1 2 ,介晓磊L 2 ,赵跃进3( 1 .郑州牧业工程高等专科学校生物工程系,河南郑州4 5 0 0 11 ; 2 .河南省高校动物营养与饲料工程技术研究中心,河南郑州4 5 0 0 1 1 ; 3 .河南省农业微生物工程技术研究中心,河南三门峡4 7 2 1 4 3 )摘要:微生物分子生态学研究表明:所研制的Z Z M Z 土壤修复菌剂能够在怀地黄根际土壤定植,并且在一定程度上能有效降解怀地黄连作后产生的化感物质。培养2 8d 后,怀地黄种植土壤样品( 干土) 中的3 种酚酸物质——香草酸、对羟基苯甲酸及阿魏酸总量降解率达5 0 .9 3 %。关键词:怀地黄;连作障碍;微生物修复中图分类号:Q 9 3 8 .1文献标识码:A文章编号:1 0 0 6 - 0 6 0 X ( 2 0 0 8 ) 0 5 - - 0 0 6 2 - 0 4R e s t o r a t i o no fc o n t i n u o u sC r o p p i n gO b s t a c l e so fR e h m a n n i aG l u t i n o s aL i b o s c hb yA p p l y i n gC o m p o u n dB a c t e r i a lM a n u r eL IZ i - g a n g ,W A N GX i n - m i n ,L I UT a i - y u ,Z H A N GX i a o - g e n ,J I EX i a o - l e i , Z H A OY u e - j i n1 1 .B i o e n g i n e e r i n gD e p a r t m e n t 《Z h e n g z h o uC o l l e g e 《A n i m a lH u s b a n d , r yE n g i n e e r i n g , Z h e n g z h o u4 5 0 0 1 1 ,P R c ;2 .E n g i n e e r i n gT e c h n o l o g yR e s e a r c hC e n t e ro f A , a m 以N u t r i t i o na n dF o r a g e ,Z h e n @ h o u4 5 0 0 1 1 。P R C ;3 .1 t e n a nA g r i c u l t u r a lM i c r o b i o l o g yE n g i n e e 砌gR e s e a r c hC e n t e r , S a n m e n x i a4 7 2 1 4 3 , P R 0A b s t r a c t :T h es o i li m p r o v e db a c t e r i a lr f l a n c l ℃( Z Z M Z ) c o u l df i e l dp l a n t e di nt h eR h i z o s p h e r eo fR e h m a n n i ag I n t i n o s aI .i b o s e ht h r o u g ht h es t u d yo fm o l e c u l a rm i c r o b i a le c o l o g y .T h eZ Z M Zs o i li m p r o v e db a c t e r i a lu l a n u i _ ;ec o u l dd e c r e a s et h ea l l c l o e h e m i c a l sg e n e r a t e da f t e rR e h m a n n i ag l u t i n o s aI J b o s c hc o n t i n u o u sc r o p p i n g .A f t e r2 8di n c u b a t i o n ,t h ec o n t i n u o u sc r o p p i n go b s t a c l e s ,s u c h 舳v a n i l l i ca c i d ,p - - h y d r o b e n z o i ca c i d ,a n df e r u l i ca c i dd e g r a d e d5 0 .9 3 %.K e yw o r d s :R e h m a n n i ag t u t i n o s aL i b o s c h ;c o n t i n u o u sc r o p p i n go b s t a c l e s ;m i c r o b i a lr e m e d i a t i o n怀地黄( R e h m a n n i aG h t t i n o s aL i b o s c h .) 为玄参科多年生草本植物,是一种名贵的中药材。李时珍《本草纲目》中写道:“江浙壤地黄者,受南方阳气,质虽光润机时力微;怀庆府产者,禀北方纯阴,皮有疙瘩而力大。”所以古今中外都以“怀货”为贵。据现代医学化验,温县地黄1 0g 的药力等于其它地区产 的3 0g 或1 0 0g 以上【l 】。但由于怀地黄种植过程中存在着严重的连作障碍,需在收获后8 。1 0a 才能复种,否则病虫害严重,甚至绝收,因此严重影响了怀地黄的产量和市场供应。为满足市场需求,不得不在原产区焦作( 古称怀庆府) 以外的其它地区种收稿日期:2 0 0 8 埘一1 0基金项目:河南省重点科技攻关项I i l ( 0 2 2 4 6 6 0 0 1 2 )作者简介:李自M I J ( 1 9 7 0 一) ,男,河南范县人,博士,副教授,主要从事环境微生物学研究。通讯作者:介晓磊植,但由于水、土、气候等自然条件与原产区存在差异,引进种植的怀地黄种子l ~2a 即发生退化,尽管也被称为怀地黄,但其药效显著降低,严重影响了其质量㈣。因此,探究怀地黄连作障碍发生机理及其防治措施已经成为亟待解决的问题。已有的研究表明,连作障碍等自然现象的发生与化感现象密切相关[ 3 1 ,化感物质主要来自根系的分泌作用,对作物生长发育有一定的抑制作用。朱广军等【4 】对怀地黄根区土壤潜在化感物质进行了分析,发现种植一茬怀地黄后的根区土壤有机化合物有长链有机酸、烯醇、酚、醛、酚酸等,土壤中的潜在化感物质种类远较空白地的丰富。有文献报道复合微生物制剂对作物连作障碍有一定的防治作用[ 5 1 。笔者以河南宛西制药股份有限公司的武陟怀地黄种植基地空白地土样和种植一茬怀地黄后的根区土样为研究对象,利用本研究室研制的复合微生物制剂探索其对怀地黄连作障碍的修复机制,以期为解决怀地黄连万方数据第5 期李自刚等:复合微生物菌肥对怀地黄连作障碍修复机制研究作减产及调控措施提供科学依据。1 材料与方法1 .1 试验材料种植试验地位于河南宛西制药股份有限公司的武陟怀地黄种植基地内,种植的怀地黄品种为“金状元”。怀地黄连作土壤Z Z M Z 微生物修复菌剂由郑州牧业工程高等专科学校生物工程系微生物技术及应用教研室研制,该制剂含有4 种不同的微生物菌种。1 .2 土样采集.分别采集未种植过怀地黄( 空白样品) 和种植一茬怀地黄( 供试样品) 后的根区土样。取土方法均为五点取样法[ 6 1 ,取土深度为土表层下2 0 ~3 0c m ,每个取样点的土壤取样重量为2k g 。取回后于实验室把土壤样品4 5 “ C 恒温烘干粉碎、过2m m 筛后对其进行土壤理化性质分析,结果如下表1 所示。表1供试土壤的主要理化性质1 .3士.样微生物D N A 提取殁D G G E 凝胶分析土样微生物D N A 提取及D G G E 凝胶分析方法参照文献用。 1 .4 连作土壤的微生物修复将种植一茬“金状元”后的供试土壤样品2k g装入盆钵中,加入2 0m lZ Z M Z 修复菌剂发酵液并与供试土壤充分混匀。为满足Z Z M Z 修复菌剂生长要求,用石灰调节空白土壤p H 至7 .5 ,并以未种植过怀地黄( 空白样品A 0 ) 为对照。两个土壤样品中均加入2 .0g 硫酸铵。保持供试土壤含水量4 0 %一6 0 %,在2 0 —2 8 0 C 条件下培养1 个月,分别在第0 、7 、1 4 、2 l 、2 8 天时进行取样分析。1 .5 连作土壤的微生物修复物质降解分析利用气相色谱与质谱连用( G C —M S ) 技术对连作土壤的怀地黄根际分泌物进行分析,以添加灭活的Z Z M Z 土壤微生物修复菌剂的连作土壤为对照,与添加活性Z Z M Z 微生物修复菌剂处理的土壤进行比较,分析微生物修复对怀地黄连作障碍物质的降解情况。G C —M S 操作条件参照李自剐等[ 8 1 和邢勇 等叭的研究。2 结果与讨论2 .1Z Z M Z4 种不同的微生物菌种的定植怀地黄连作土壤微生物修复菌剂能不能在被修复的怀地黄根际土壤内定植是其能否起修复作用的基础。目前,研究微生物在土壤定植的方法常用的是平板计数培养法,大量研究表明平板计数法 不能检测那些未能培养的细菌m l o t 。同时,土壤微生物修复菌剂在怀地黄根际土壤内定植降解怀地黄连作障碍物质的过程中不可避免地将伴生其它的怀地黄根际微生物,而土壤微生物中存在大量的不可分离培养的微生物[ 8 1 ,因此研究Z Z M Z 土壤微生物修复菌剂中4 种微生物在怀地黄根部土壤定植及其对怀地黄根部土壤不可培养微生物种群影响 传统微生物培养方法难以解决【嘲,为此采取了能够对不可培养微生物进行研究的分子生物学方 法一变性梯度凝胶电泳法( D e n a t u r i n gG r a d i e n t G e lE l e t r o p h o r e s i s ,D G G E ) 。D G G E 法是基于原核微生物16 Sr R N A 保守性的D N A 指纹技术,它能有效分析复杂微生物群落及其多样性且无须培养微生物,受到广泛重视。其 基本原理是长度相同而碱基组成不同的D N A 序列在不同变性条件下变性,在变性梯度凝胶上的特定位置形成泳带【1 I 】。 图1 是添加Z Z M Z 土壤微生物修复菌剂处理的怀地黄根际土壤样品分别培养7 、1 4 、2 l 、2 8d 时的细菌D G G E 图谱。将Z Z M Z 土壤修复菌剂组成菌图1 怀地黄根际土壤细菌的D G G E 图谱注:M :Z Z M Z 菌剂标准样品;P :空白对照( A O ) ;条带.1 4 :分别为第7 、1 4 、2 l 、2 8 天样品。株的1 6 Sr D N AV 3 区P C R 产物作为D G G E 图谱标准条带,分别标记为Z Z M Z l 、Z Z M Z 2 、Z Z M Z 3 和Z Z M Z 4 。图谱显示:空白对照P 泳道中的细菌分子微生态群落构成简单、稳定,且Z Z M Z 土壤修复菌剂的组成菌落Z Z M Z l 、Z Z M Z 2 、Z Z M Z 3 和Z Z M Z 4 不是空万方数据湖南农业科学第5 期白土壤中的优势菌株;而添加Z Z M Z 土壤修复菌剂处理的土壤中,在培养7d 时,细菌群落的优势菌群就发生了较大变化,群落的分子多态性明显增加,第1 4 天时Z Z M Z 成为土壤细菌优势菌群,并且在培养期的前2 1d 内保持优势。随着土壤中怀地黄连作障碍类物质的不断降解,到第2 8 天时,经修复剂处理的土壤细菌群落结构发生了极大转化,优势种群也发生了相应变化,预示着物质转化进入了一个新的阶段。微生物分子多态性分析结果显示,Z Z M Z 土壤微生物修复菌剂已在怀地黄根际土壤中成功定植。2 .2Z Z M Z 土壤修复茵剂对连作土壤的修复作用利用气相色谱与质谱连用技术( G C —M S ) 对种植一茬后的怀地黄根土壤根际分泌物进行分析,结果如图2 所示。图2 显示,从连作后的怀地黄根际土壤分泌物图2 怀地黄根际土壤根分泌物G C —M S 圈注:标号对应物质分别为1 :苯甲酸;2 :2 ,4 - 已二烯二酸;3 :苯丙酸;4 :对羟基苯甲酸;5 :丁二酸;6 :十四烷酸;7 :香草酸;8 :十六烷酸;9 :十八烷酸;1 0 :阿魏酸。中检测出苯甲酸、苯丙酸、对羟基苯甲酸、香草酸、阿魏酸、丁二酸、2 ,4 _ 已二烯二酸及3 种烷酸等物质,其中前5 种都是已被发现存在于黄瓜根分泌物中的化感物质切。阿魏酸是吲哚乙酸氧化酶的辅基,而吲哚乙酸是引起植物块根膨大的内源激素,阿魏酸在怀地黄土壤中积累,会提高吲哚乙酸氧化酶的活性,氧化Ⅱ弓I 哚乙酸,降低I A A 的含量,进而导致块根不能膨大,影响植物体内如细胞分裂、蛋白质合成、酶活性、光呼吸等,不利于植物幼苗生长。据此推测,增加的这些酸性物质成分也极有可能是怀地黄的化感物质,是怀地黄连作障碍的发生因子。对Z Z M Z 土壤微生物修复菌剂修复的土壤样品进行检测,与添加灭活修复剂的土壤样品( 对照)对比发现:Z Z M Z 土壤修复菌剂施入土壤中1 4d 后( 图3 ) ,3 种酚酸的含量均已发生变化。其中,阿魏酸的降解最为明显,峰高已降低一半( 从峰值判断,峰形未分开) 。对羟基苯甲酸及香草酸的含量也有所降低,但降幅不明显。Z Z M Z 土壤修复菌剂施入2 8d 后( 图4 ) 测定土壤中3 种酚酸物质含量发现,添加修复菌剂的土壤样品( 干土) e e 对羟基苯甲酸、香草酸和阿魏酸的含量分别为4 .1 4 4 、2 .3 5 4 和5 .3 5 3 斗g /g ,与对照相比,分别降低了6 6 .0 %、2 8 .9 %和4 8 .4 %。且3 种酚酸总量在Z Z M Z 土壤修复菌剂修复土壤样品中的降解率达到了5 0 .9 3 %,表明Z Z M Z 土壤修复菌剂能够在一定程度上降解怀地黄连作后产生的化感物质。l 珊瑚瑚‘珊1 0 0 蛐? n 0 ■舯- 舯l 咖 (B)分竹3 添加Z Z M Z 土壤修复茵剂1 4d 后土壤中的酚酸含量A :灭活菌剂处理B :茁剂修复处理L^ 。.八m ⅫⅫ4 0 0 Ⅻ∞ⅫⅫⅫI Q 0 0mm ⅫⅧ5 0 0 ⅫⅧU O ⅫI Q Q Of^)H*(-)舯-图4 添加Z z M z 土壤修复菌剂2 8d 后土壤中的酚酸含量^ :灭活菌剂处理B :菌剂修复处理3讨论陈慧等f t 3 】研究发现,地黄连作对其根际微生物区系及土壤酶活性会产生较大影响。随种植年限的增加,根际细菌和真菌减少,放线菌增多,对土壤微生物环境产生了显著影响,破坏了微生物的种群平衡,导致地黄根际微生态平衡失调,并推测根系分泌物引起土壤微生物数量和种类的大幅度变化可能是地黄连作障碍的主要原因之一。有研究表明,在根系分泌的物质中,酚酸类化感物质大量积累在土壤中时,会抑制真菌生长,引起作物和林下植物生长缓慢,导致农作物减产、连作障碍和自然生态环境破坏。吕卫光等“4 1 研究发现,丙烯酸、对羟基苯甲酸是黄瓜根系分泌物中的主要化感特质组分,能强烈抑制黄瓜根系脱氢酶、A T P 酶、硝酸还原酶和超氧化物歧化酶的活性,引加堪MH他m傩∞∞舵∞nnOOOO0OOO0万方数据第5 期李自刚等:复合微生物菌肥对怀地黄连作障碍修复机制研究起黄瓜的自毒作用,使连作黄瓜根系活性降低,养分外渗速率加快,吸收养分减少,根系抗逆性降低, 黄瓜生长受到抑制。对辣椒的研究1 1 地发现,随着根系分泌物含量的增加,辣椒的根、茎、叶的生长均受到影响,其中根鲜重受到的抑制作用最大,辣椒根系活力、抗氧化的保护酶( S O D ,P O D ,C A T ) 活性明显下降,逆境生理指标丙二醛( M D A ) 生成量和相对电导率值明显增大。但研究中检测到的酚酸类物质是否就是怀地黄的连作障碍因子,还需要进一步的试验验证。引入拮抗菌或接种有益微生物可以对连作障碍进行有效的生物修复。胡春江等【l q 在连作障碍的大豆土壤中引人海洋放线菌,能够有效的减轻大豆连作障碍。孙红霞等1 1 7 研究发现施用E M 菌剂可以有效防治大棚黄瓜的连作障碍。喻国辉等【l 司利用微生物来缓解苯丙烯酸对黄瓜生长的抑制,但总体来讲,利用生物防治的手段解决作物连作障碍的研究还较少。笔者的初步研究表明,Z Z M Z 土壤修复菌剂可以在怀地黄土壤中定植并有效降解怀地黄连作土壤中的酚酸含量,随后将针对该修复剂是否能有效缓解怀地黄连作障碍,对怀地黄根茎生长以及产量产生正面影响进行进一步的研究。参考文献:【l 】丁自勉.地射M 1 .北京:中国中医药出版社,2 0 0 1 .【2 】周俊英.中药地黄的染色体研究明.山东科学,2 0 0 2 ,1 5 ( 1 1 :2 0 .【3 】阮维斌,赵紫娟,薛健,等.高效液相色谱法检测与化感现象相关的5 种酚酸【J 】.应用与环境生物学报,2 0 0 1 ,7 ( 6 ) :6 0 9 - 6 1 2 .【4 】朱广军,王明道,吴宗伟,等.地黄根区土壤潜在化感物质的G C —M S 分析田.河南科学。2 0 0 7 ,2 5 ( 2 ) :2 5 5 —2 5 7 .【5 】李保会.复合微生物菌肥对连作草莓矿质养分吸收及产量的影响【J 】.河北农业大学学报,2 0 0 7 ,3 0 ( 3 ) :4 4 _ 4 7 .【6 】中国土壤学会.土壤农业化学分析方法【M 】.北京:中国农业科技出版社,1 9 9 9 .【7 】李自刚,黄为一.有机堆肥P I ::R —D G G E 的微生物分子多态性分析明.土壤学报,2 0 0 5 ,4 2 ( 6 ) :4 1 - 4 3 .【8 】李自刚,黄为一.奶牛粪堆肥产品低分子量有机物质分析研究田.植物营养与肥料学报,2 0 0 6 ,1 2 ( 3 ) :4 3 7 _ 4 4 4 .【9 】邢勇,段小燕.植物的自毒作用们.生物学教学,2 0 0 2 ,2 7 ( 1 1 1 :3 2 - 3 3 .【1 0 ] H e a dlM 。S a n n d e r sJR ,P i c k u pRW .M i c r o b i a le v o l u t i o n , d i -v ∞i t y , a n de c o l o g y :Ad e c a d eo fr i b o s o m a lR N Aa n a l y s i so fU l I -c u l t i v a t e dl l l i c m 嘴帅j 肛∞【刀.M i c r o b i a lE c o l o s y , 1 9 9 8 ,3 5 :1 2 2 1 .【l1 】M u y z e rG ,W 硼lEC ,U i t t e r l i n d e nAG .P r o f i l i n go fC o m p l e xm i c r o b i a lp o p u l a t i o nb yD G G Ea n a l y s i so fP C Rg e n e se n c o d i n gf o r1 6 S r R N A [ Y 1 .A p p l i e da n dE n v i r o n m e n t a lM i c r o b i o l o g y ,1 9 9 3 ,5 9 ( 2 ) :6 9 5 4 0 0 .【1 2 】W h i t e h e a dDC .P h e n o l i cC o m p o u n d si nS o i l 鹪I n f l u e n c e db yt h eG r o w t ho fD i f f e r e n tP l a n tS p e c i e s [ J ] .A p p l i e dE c o l o g y ,1 9 8 2 ,1 9 :5 7 9 - 5 8 8 .【1 3 】陈慧.郝慧荣,熊君,等.地黄连作对根际微生物区系及土壤酶活性的影响叨.应用生态学报,2 0 0 7 ,1 8 ( 1 2 ) :”5 5 —2 7 5 9 .【1 4 】吕卫光,张春兰,袁飞,等.化感物质抑制连作黄瓜生长的作用机理【J 】.中国农业科学,2 0 0 2 ,3 5 ( 1 ) :1 0 6 - 1 0 9 .1 1 5 】侯永侠。周宝利,吴晓玲,等.辣椒根系分泌物化感作用的研究们.沈阳农业大学学报,2 0 0 7 ,3 4 ( 4 ) :5 0 4 - 5 0 7 .【1 6 1 胡春江,薛德林,王书锦,等.大豆连作障碍研究Ⅲ.海洋放线菌M B 一9 7 促进连作大豆增产机理叨.应用生态学报,2 0 0 2 ,1 3 ( 9 ) :1 0 9 5 - 1 0 9 8 .【1 7 】孙红霞,武琴,郑国祥,等.E M 对茄子、黄瓜抗连作障碍和增强土壤生物活性的效果m .土壤,2 0 0 1 ,5 :2 6 4 - 2 6 7 .【1 8 】喻国辉,谢银华,陈燕红,等.利用微生物缓解苯丙烯酸对黄瓜生长的抑制叨.微生物学报,2 0 0 6 ,4 6 ( 6 ) :9 3 4 - 9 3 8 .( 责任编辑:张广平)( 上接第6 1 页)甘肃省植保站对小麦的喷叶试验结果表明,旱立停可延长小麦叶片的光合作用功能,并可防止干热风引起的旗叶干尖,从而增加结实率和籽粒的重量,一般可使小麦增产1 0 %~2 0 %。广西壮族自治区植保总站对水稻喷施旱立停,增产达2 2 .7 %;用旱立停水溶液浇灌果树和粮食作物,可减少因干旱引起的落花、落果。从而增加产量。综上所述,旱立停高效植物抗旱剂使用范围较广。在正常气候条件下,用较稀浓度( 15 0 0 ~50 0 0倍液) ,均有增产提质的明显效果,在干旱条件下,浓度增加到5 0 0 ~l0 0 0 倍,即可起到抗旱、增收、保树的多种作用。旱立停植物抗旱剂开发,符合全国农业节水发展规划要求,是旱作节水技术中生化节水技术的发展,它的广泛推广应用,将给干旱地区农作物稳产、高产提供农业技术保障,进一步减少干旱地区植物 水分的无效蒸腾。对于提高水分利用率,防止土壤退化和荒漠化,提高粮、油、蔬菜等农产品质量,具有重要的现实意义。参考文献:【l 】美国F D A ( g o o da n dD r u gA d m i n i s t r a t i o n ) .乙酰水杨酸在农业上应用[ z3 .联邦公告。1 9 9 8 。7 1 .4 7 2 1 8 .f 2 】蒋长宁,张灿.新型植物抗旱剂一2 - ( 7 .酰氧基) 苯甲酸的抗旱应用效果研究[ J ] .农药科学与管理.2 0 0 7 ,2 8 ( 2 ) :2 1 —2 4 ,2 9 .( 责任编辑:卢红玲)万方数据复合微生物菌肥对怀地黄连作障碍修复机制研究复合微生物菌肥对怀地黄连作障碍修复机制研究作者:李自刚, 王新民, 刘太宇, 张晓根, 介晓磊, 赵跃进, LI Zi-gang, WANG Xin-min , LIU Tai-yu, ZHANG Xiao-gen, JIE Xiao-lei, ZHAO Yue-jin 作者单位:李自刚,LI Zi-gang(郑州牧业工程高等专科学校生物工程系,河南,郑州,450011;河南省高校 动物营养与饲料工程技术研究中心,河南,郑州,450011;河南省农业微生物工程技术研究中心 ,河南,三门峡,472143), 王新民,刘太宇,张晓根,介晓磊,WANG Xin-min,LIU Tai-yu,ZHANG Xiao-gen,JIE Xiao-lei(郑州牧业工程高等专科学校生物工程系,河南,郑州,450011;河南省 高校动物营养与饲料工程技术研究中心,河南,郑州,450011), 赵跃进,ZHAO Yue-jin(河南 省农业微生物工程技术研究中心,河南,三门峡,472143) 刊名:湖南农业科学 英文刊名:HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES 年,卷(期):2008(5) 被引用次数:3次参考文献(18条)参考文献(18条)1.丁自勉 地黄 20012.邢勇;段小燕 植物的自毒作用[期刊论文]-生物学教学 2002(11)3.李自刚;黄为一 奶牛粪堆肥产品低分子量有机物质分析研究[期刊论文]-植物营养与肥料学报 2006(03)4.李自刚;黄为一 有机堆肥PCR-DGGE的微生物分子多态性分析[期刊论文]-土壤学报 2005(06)5.中国土壤学会 土壤农业化学分析方法 19996.喻国辉;谢银华;陈燕红 利用微生物缓解苯丙烯酸对黄瓜生长的抑制[期刊论文]-微生物学报 2006(06)7.孙红霞;武琴;郑国祥 EM对茄子、黄瓜抗连作障碍和增强土壤生物活性的效果[期刊论文]-土壤 2001(05)8.胡春江;薛德林;王书锦 大豆连作障碍研究Ⅲ.海洋放线菌MB-97促进连作大豆增产机理[期刊论文]-应用生态学报2002(09)9.侯永侠;周宝利;吴晓玲 辣椒根系分泌物化感作用的研究[期刊论文]-沈阳农业大学学报 2007(04)10.吕卫光;张春兰;袁飞 化感物质抑制连作黄瓜生长的作用机理[期刊论文]-中国农业科学 2002(01)11.陈慧;郝慧荣;熊君 地黄连作对根际微生物区系及土壤酶活性的影响[期刊论文]-应用生态学报 2007(12)12.Whitehead D C Phenolic Compounds in Soil as Influenced by the Growth of Different Plant Species198213.Muyzer G;Waal E C;Uitterlinden A G Profiling of Complex microbial population by DGGE analysis ofPCR genes encoding for 16SrRNA 1993(02)14.Head I M;Sannders J R;Pickup R W Microbial evolution,diversity,and ecology:A decade of ribosomalRNA analysis of uncultivated microorganisms[外文期刊] 199815.李保会 复合微生物菌肥对连作草莓矿质养分吸收及产量的影响[期刊论文]-河北农业大学学报 2007(03)16.朱广军;王明道;吴宗伟 地黄根区土壤潜在化感物质的GC-MS分析[期刊论文]-河南科学 2007(02)17.阮维斌;赵紫娟;薛健 高效液相色谱法检测与化感现象相关的5种酚酸[期刊论文]-应用与环境生物学报2001(06)18.周俊英 中药地黄的染色体研究[期刊论文]-山东科学 2002(01)引证文献(3条)引证文献(3条)1.徐志峰.王旭辉.丁亚欣.王钰 生物菌肥在农业生产中的应用[期刊论文]-现代农业科技 2010(5)2.高峰.尹宝重.扈金丽.甄文超.齐永志 以自毒物质高效降解菌B3512为功能菌的土壤添加物防治草莓连作障碍的研究[期刊论文]-河北农业科学 2009(9)3.郭军.顾闽峰.祖艳侠.吴永成.郑佳秋 设施栽培蔬菜连作障碍成因分析及其防治措施[期刊论文]-江西农业学报2009(11)本文链接:http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_hunannykx200805023.aspx
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